糖尿病腎病模型構建

一、糖尿病腎病背景簡介

 糖尿病腎病（diabetic nephropathy，DN） 是糖尿病主要的慢性并發(fā)癥之一，也是導致終末期腎病的主要原因。控制血糖及血壓能夠減緩糖尿病患者向終末期腎病轉(zhuǎn)化，但目前臨床上尚缺乏新的治療方法醫(yī)治糖尿病腎病。建立適當?shù)膭游锬Ｐ停梢詾檠芯緿N的病因、發(fā)病機制和病理生理改變提供重要的線索，同時也為臨床治療DN提供理論依據(jù)。

二、糖尿病腎病模型技術服務簡介

 糖尿病腎病模型技術服務是用于研究糖尿病腎病發(fā)病機制、病理生理改變以及評估治療方法的工具。這類模型主要分為誘發(fā)性模型、自發(fā)性模型和基因工程小鼠模型。

三、糖尿病腎病模型構建方法

 1. 實驗動物

   SD大鼠  200g左右

 2. 實驗材料

   高脂飼料，STZ，檸檬酸鈉緩沖液

 3. 化學藥物誘導DN模型制備流程

 適應性飼養(yǎng)7天后，將普通飼料更換為高脂飼料，繼續(xù)飼養(yǎng)8周后，禁食不禁水12h，記錄小鼠的體重和空腹血糖值。根據(jù)小鼠體重，腹腔注射STZ溶液，造模7天后，尾部取血測量空腹血糖。若血糖值≥11.1mmol/L視為糖尿病造模成功。繼續(xù)給予糖尿病小鼠高脂飼料飼養(yǎng)4~8周。隨病程延長，后期可出現(xiàn)腎間質(zhì)小血管玻璃樣變等腎小管及間質(zhì)病理改變，模型鼠尿蛋白排泄率增加。

 4. 模型驗證

  1、實驗結束前1天，用代謝籠收集24h尿蛋白、尿肌酐。次日以1%戊bbt納麻醉，從心臟采血，檢測血肌酐、血尿素氮等指標。并按照公式計算內(nèi)聲肌酐清除率（Ccr=尿肌酐/血肌酐*24h尿量）。

  2、腎組織病理學檢測：處死大鼠取右腎，4%多聚甲醛固定，乙醇逐級脫水，石蠟包埋切片，常規(guī)HE及PAS染色，樹膠固封，光鏡下觀察腎小球毛細血管叢呈分葉狀，細胞外基質(zhì)增多，系膜區(qū)擴大。

四、小結

 人類糖尿病以2型占多數(shù)，因此建立理想實用的2型糖尿病動物模型，對其發(fā)病機制及其慢性并發(fā)癥的研究具有重要意義。高糖高脂+小劑量STZ造成DM模型，然后依其自然病情發(fā)展成DM模型。

五、參考文獻

[1] 郭嘯華，劉志紅，李恒，等．高糖高脂飲食誘導的2型糖尿病大鼠模型及其腎病特點 [J]．中國糖尿病雜志， 2002，10(5)：290．

[2] 高蘋 ，賈汝漢，王學玉，ebst對2型糖尿病大鼠腎組織中核因子一 B的調(diào)節(jié)[J]．中華腎臟病雜志，2002， 18(5)：364．

[3] Utimura R，F(xiàn)ujihara CK，Mattar AL，et a1．Mycophe— nolate mofetil prevents the development of gomerular i~ury in experimental diabetes[J]．Kidney Int，2003， 63(1)：209．

[4] Chen S，Evans T，Deng D，et a1．Hyperhexosemia in— duced functional and structural changes in the kidneys： role of endothe1ins口]．Nephron，2002，90(1)：86． E5] Mogensen CE，Schmitz A，Christensen CK．Compara- tive renal pathophysio1ogy relevant to IDDM and NID-DM patients[J]．Diabetes Metab Rev，1988，4(5)：453．

[6] 高蘋，賈汝漢，褚瑰麗，等．氟伐他汀對糖尿病大鼠腎小管間質(zhì)病變的保護作用及其機制[J]．中華老年醫(yī)學雜 志 ，2004，23(11)：800．